Успешное решение поставленной задачи требует от исследователя глубоких знаний о современных методических приёмах иммуноцитохимии, флуоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии.
Вы здесь
- Как указывалось выше, в конфокальной лазерной микроскопии изображение всего образца получают путём сканирования.
- Квалифицированному специалисту-морфологу для успешного выполнения задач комплексных междисциплинарных исследований уже недостаточно владения только основами общей, частной морфологии и патологии, но требуется также и понимание главных биофизических принципов, лежащих в основе феноменов, используемых при создании приборов, предназначенных для флуоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии.
- Для облегчения идентификации клеток и тканей, а также для определения положения, формы клеток, их апоптозных изменений, фазы митотического цикла в исследованиях, проводимых с применением лазерной конфокальной микроскопии и обычной флуоресцентной микроскопии, используется окраска ядер клеток соответствующими флуоресцентными красителями.
- Например, по изменению FRET-сигнала между G? иG?? субъединицами G-белка, слитыми с флуоресцирующими белками CFP и YFP, можно охарактеризовать динамические характеристики диссоциации G-белка в живых клетках; две субъединицы никотиновых ацетилхолиновых рецепторов ?4 и ?2, слитые с YFP и CFP, послужили основой для разработки клеточных систем, на основе которых с применением спектральной конфокальной микроскопии показана возможность измерять уровень ?4?2-рецепторов и изучать процессы их сборки-диссоциации под воздействием различных стимулов.
- Конфокальная микроскопия является разновидностью флуоресцентной микроскопии с улучшенным разрешением вдоль оптической оси объектива, которое достигается за счёт использования принципа конфокальной фильтрации флуоресценции.
- Использование лазерной конфокальной микроскопии для изучения объектов, подвергнутых окраске флуоресцентными красителями, даёт возможность определять локализацию специфических молекул и органелл с высокой точностью.
- При конфокальной микроскопии данный эффект может быть компенсирован за счёт линейного или покадрового усреднения сканируемых изображений.